高壓蒸汽滅菌是利用熱蒸汽穿透細胞使其蛋白質等物質變性而起到滅菌的作用的，影響其滅菌效果的因素有：
1、冷空氣是否排盡(滅菌器滅菌之前要排冷空氣，一般是排氣5min)
2、滅菌溫度和壓力是否達到要求
3、待滅菌物品擺放是否過于緊密(影響蒸汽的穿透，待滅菌物品需要裝入容器時，如培養基，塞子要有透氣效果，如棉球，不能密封)
4、壓力蒸汽是否維持在要求范圍內(自動控溫的滅菌器可以自動維持在設定溫度，手動的則需要認真操作，溫度過低，滅菌效果不好，溫度過高，營養成分損失嚴重)
5、可以采用邊滅菌邊排氣的方法，即在達到滅菌溫度壓力后，關掉排氣閥時，不將排氣閥關死，留一小縫繼續排氣，這樣可以將沒排完的冷空氣繼續排完，冷凝水與排氣閥為同一管道是還能將冷凝水排除)
高壓蒸汽滅菌的原理和注意事項：
第一，無菌包不宜過大(小于50cm×30cm×30cm)，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒滅菌完畢，關閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態
第二，布類物品應放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進入包裹中央，嚴重影響滅菌效果
第三，定期檢查滅菌效果。經高壓蒸汽滅菌的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。高壓蒸汽滅菌效果的監測：有以下三種方法
高壓蒸汽滅菌監測
一：工藝監測，又稱程序監測。根據安裝在滅菌器上的量器(壓力表、溫度表、計時表)、圖表、指示針、報警器等，指示滅菌設備工作正常與否。此法能迅速指出滅菌器的故障，但不能確定待滅菌物品是否達到滅菌要求。此法作為常規監測方法，每次滅菌均應進行
二：化學指示監測。利用化學指示劑在一定溫度與作用時間條件下受熱變色或變形的特點，以判斷是否達到滅菌所需參數
